1932年，绝杀“一·二八”事变后，绝杀上海滩最有声望的绝杀民族资本家夏伯为阻止日军进攻上海，制定了名为“绝杀”的绝杀计划。他邀请了冷面杀手丁芒作为执行者，绝杀并招募了一批职业杀手作为后备力量。绝杀为了警示与日军关系密切的绝杀日商，夏伯指示丁芒暗杀了两位日商，绝杀这一举动让日本驻沪领事馆陷入了恐慌。绝杀松本太郎副领事命令黑龙会头目川琦深入调查此次事件的绝杀主谋。在执行任务过程中，绝杀丁芒及其生死兄弟燕七不幸中了埋伏，绝杀怀疑内部存在奸细。绝杀为了获取“绝杀”计划的绝杀详情，松本指示川琦将夏伯之子夏威绑架并关押于码头。绝杀随后，夏伯的女儿韵兰请求留在父亲身边侍奉他，并坦白自己因6年前的一次侮辱生下一女，这使她无法得到父亲的原谅。此时，叶竹青带着人马成功解救了韵兰母女，侯叔在此次行动中不幸牺牲。得知真相后，夏伯将“绝杀”计划全部公开，揭露了内奸的身份——叶竹青早已背叛并投靠松本。最终，叶竹青在企图绑架韵兰时被杀死，而阿荫也在混乱中丧生。为了完成“绝杀”计划，夏伯与众多杀手一同行动，然而却遭到国民党军警的突然袭击，在同胞手下的枪口下牺牲。丁芒在寻找叶竹青复仇的过程中，亲眼目睹了阿荫之死，并亲手终结了叶竹青的生命。最终，《绝杀》以5月5日国民党政府签署《淞沪停战协定》，与日本妥协作为背景，展现了上海人民面对外敌和内奸的双重压迫时的英勇与牺牲。